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Title: Controle de bactérias visando à propagação in vitro de pimenteira-do-reino
Advisor: SOUZA, Joanne Moraes de Melo
Authors: PACHECO, Laila Brabo
RODRIGUES, Mateus Santana
Keywords: Pimenteira-do-reino (Piper nigrum L.) - Cultivo
Biocida PPM® (Plant Preservative Mixture)
Bactérias endofíticas
Propagação in vitro - Pimenteira-do-reino
Issue Date: 2021-07-15
Publisher: UFRA/Campus Belém
Citation: PACHECO, Laila Brabo; RODRIGUES, Mateus Santana. Controle de bactérias visando à propagação in vitro de pimenteira-do-reino. Orientador: Joanne Moraes de Melo Souza; Oriel Filgueira de Lemos. 2021. 25 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Agronomia) – Universidade Federal Rural da Amazônia, Campus Belém, PA, 2021
Resumo: A pimenteira-do-reino (Piper nigrum L.) é uma planta trepadeira perene, pertencente à família botânica Piperaceae de origem indiana. A pimenta-do-reino brasileira se destaca pela qualidade quanto ao aroma, sabor e pungência. Para produzir a pimenta-do-reino é realizada a propagação da planta de forma sexuada (sementes) ou assexuada (estaquia). A propagação in vitro é uma técnica que vem sendo utilizada para produzir plantas em larga escala, sadias e livres de patógenos. No entanto, fatores como a presença de microrganismos endógenos nos tecidos da pimenteira-do-reino afetam a regeneração de plantas in vitro. Sendo assim, este trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência no controle de bactérias endofíticas no cultivo in vitro em dois genótipos de pimenteira-do-reino. O experimento foi realizado no Laboratório de Recursos Genéticos e Biotecnologia Vegetal da Embrapa Amazônia Oriental localizada em Belém/Pará. Os explantes utilizados foram provenientes de dois genótipos: híbridos intraespecíficos recíprocos denominados H5 (Guajarina X Bento) e H20 (Bento X Guajarina) com bactérias nas plantas mantidas em cultivo no laboratório. O meio de cultura utilizado para a propagação in vitro foi meio básico MS suplementado com 0,5 mg L-1 BAP (6-benzilaminopurina) e 0,2 mg L-1 de AIA (ácido indolilacético) com o biocida PPM® (Plant Preservative Mixture) em diferentes concentrações (0, 1, 5, 10, 20 mL L-1). Após 30 dias da instalação do experimento foi possível observar que houve efeito das doses de PPM® no meio de cultura, no controle de bactérias in vitro. Sendo assim, os genótipos responderam de forma semelhante entre as dosagens. Para a altura se teve dosagem ótima de 6,9 mL L-1 de PPM®, porém quando diminuiu ou aumentou as dosagens foram observados uma redução no desenvolvimento das plantas. A dosagem ótima para a média do número de folhas (em ambos os híbridos) foi de 6,35 mL L-1 para se ter uma média de folhas de 1,33, mas ao suplementar o meio de cultura com concentrações maiores de PPM®, houve um declínio do número de folhas. Em relação a contaminação, à medida que foi aumentando a concentração de PPM® a contaminação foi reduzida. Porém, ao suplementar o meio de cultura com doses mais elevadas, o explante não apresentou desenvolvimento, demonstrando características de fitointoxicação. Conclui-se que há controle de bactérias como o uso de PPM®, na concentração de 20 mL L-1 para os híbridos H5 e H20, porém, a dose não permite o desenvolvimento dos explantes, provocando efeito tóxico nos híbridos. A manutenção das dosagens do PPM® é necessária para os próximos subcultivos para observar se ocorre a diminuição da manifestação bacteriana, bem como testar metodologias de assepsia com imersão do explantes de pimenteira-do-reino em solução de PPM® e sugere-se fazer a identificação das possíveis bactérias.
Abstract: Black pepper (Piper nigrum L.) is a perennial plant belonging to the botanical family Piperaceae of Indian origin. Brazilian black pepper stands out for its quality in terms of aroma, flavor, and pungency. To produce black pepper, the plant is propagated sexually (seeds) or asexually (cuttings). In vitro propagation through tissue culture is a technique that has been used to produce large-scale, healthy, and pathogen-free plants. However, factors such as the presence of endogenous microorganisms in black pepper tissues affect in vitro plant regeneration. Therefore, this work aimed to evaluate the efficiency in the control of endophytic bacteria in vitro in two black pepper genotypes. The experiment was carried out at the Laboratory of Genetic Resources and Plant Biotechnology at Embrapa Amazônia Oriental, located in Belém/Pará. The explants used were from two genotypes: reciprocal intraspecific hybrids called H5 (Guajarina X Bento) and H20 (Bento X Guajarina) with bacteria in plants kept in laboratory cultivation. The culture medium used for in vitro propagation was MS basic medium supplemented with 0.5 mg L-1 BAP (6-benzylaminopurine) and 0.2 mg L-1 of IAA (indolylacetic acid) with the biocide PPM® (Plant Preservative Mixture) at different concentrations (0, 1, 5, 10, 20 mL L-1). After 30 days of installation of the experiment, it was possible to observe that there was an effect of the doses of PPM® in the culture medium, in the control of bacteria in vitro. Thus, genotypes responded similarly between dosages. For height there was an optimal dosage of 6.9 mL L-1 of PPM®, but when the dosages were decreased or increased, a reduction in plant development was observed. The optimal dosage for the number of leaves (in both hybrids) was 6.35 mL L-1 to have an average of 1.33 leaves, but when supplementing the culture medium with higher concentrations of PPM®, there was a decline in the number of leaves. Regarding contamination, as the concentration of PPM® increased, the contamination was reduced. However, when supplementing the culture medium with higher doses, the explant did not show development, demonstrating phytotoxicity characteristics. It is concluded that there is control of bacteria such as the use of PPM®, at a concentration of 20 mL L-1 for the hybrids H5 and H20, however, the dose does not allow the development of explants, causing a toxic effect on the hybrids. The maintenance of PPM® dosages is necessary for the next subcultures to observe if there is a decrease in bacterial manifestation, as well as to test asepsis methodologies with immersion of black pepper explants in PPM® solution and it is suggested to do the identification of possible bacteria.
URI: bdta.ufra.edu.br/jspui//handle/123456789/1805
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